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橫向流動(dòng)試紙條LFD試紙,為什么要做成Red-Blue雙色

   剛接觸Lateral flow產(chǎn)品的時(shí)候,要么是膠體金,要么是紅乳膠。也沒(méi)有想過(guò)還有更多變化。直到看到梅里埃之前的VIKIA系列的快診產(chǎn)品,才意識(shí)到彩色乳膠,可紅,可藍(lán),可黃,可綠,可彩虹。有些產(chǎn)品就采用了多色顆粒在一個(gè)產(chǎn)品上。接觸過(guò)一個(gè)流感的產(chǎn)品,C線綠色,甲流藍(lán)色,乙流紅色。還有一種就是C線變色的設(shè)計(jì),如BinaxNow的xinguan抗原試劑。

 

   在使用之前,就有一條藍(lán)色C線。在完成測(cè)試之后,C線從藍(lán)色變成紅色。
今天介紹一款核酸試紙,來(lái)自南京沃博生物的Red-Blue雙色核酸試紙。它采用雙色系統(tǒng)不僅僅是為了好看,還有一番別出心裁。
   沃博生物的核酸試紙的原理和其也是非常類似的,但是親和素用來(lái)偶聯(lián)了金顆粒,抗FITC抗體用來(lái)包被了T線。同時(shí)采用紅色膠體金顆粒對(duì)應(yīng)T線藍(lán)色乳膠顆粒對(duì)應(yīng)C線。

 

 

試紙完成測(cè)試后,從左往右分別展示的是,陰性,陽(yáng)性,無(wú)效,和假陽(yáng)結(jié)果

 

 

當(dāng)使用快速等溫?cái)U(kuò)增核酸,特別是RPA系統(tǒng)時(shí),很容易出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。
通過(guò)使用Red-Blue雙色系統(tǒng),當(dāng)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果時(shí),就可以進(jìn)行快速的假陽(yáng)性分析。 

假陽(yáng)1,如果T線紅色比較強(qiáng),可能核酸擴(kuò)增出假陽(yáng) 

假陽(yáng)1,如果T線紅色比較弱,可能引物形成二聚體

假陽(yáng)2,如果T線藍(lán)色假陽(yáng),修飾了FITC的這段引物具備了捕獲Mouse IgG的特性,成了一個(gè)Aptamer。

這樣可以幫助科研人員快速的進(jìn)行Trouble shooting, 也是多色系統(tǒng)一種創(chuàng)新的應(yīng)用。

還把單T線升級(jí)到了雙T線,實(shí)現(xiàn)雙靶標(biāo)雙系統(tǒng)檢測(cè)。

 

并且雙系統(tǒng)T線采用獨(dú)立的系統(tǒng),相互不會(huì)干擾和競(jìng)爭(zhēng)

T線,

biotin-DNA-FITC

T線,

biotin-DNA-FITC 

Digoxin-DNA-TAMRA 

除了上述的彩虹核酸試紙,也有用于CRISPR的Cas12/13專用檢測(cè)試紙。并且好調(diào)試好了檢測(cè)濃度。

 

 

檢測(cè)探針質(zhì)量

在陰性對(duì)照中,稀釋探針的濃度至200 nM,進(jìn)行切割反應(yīng)。當(dāng)試紙條結(jié)合墊端浸入Cas12/Cas13切割產(chǎn)物后的5~7 min內(nèi),試紙條T線顯色,即說(shuō)明探針含游離的Biotin或者游離的FITC,探針純度不足導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果。建議更換探針合成供應(yīng)商,重新合成探針。

 

探針載量接受范圍

探針使用濃度為20~50nM的情況下,試紙條結(jié)合墊端浸入Cas12/Cas13切割產(chǎn)物后的30 min內(nèi),T線均不會(huì)顯色。

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