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HA-Tag RIP 試劑盒（動(dòng)物）
| 貨號(hào) | F1505 | 售價(jià)（元） | 3570/5970 |
| 規(guī)格 | 12T/24T | CAS號(hào) |
- 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
存儲(chǔ) |
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F1505-12T |
HA-Tag RIP試劑盒（動(dòng)物） |
12T |
-20℃ |
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F1505-24T |
HA-Tag RIP試劑盒（動(dòng)物） |
24T |
-20℃ |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
本試劑盒采用ChainFree® Anti-HA 磁珠來(lái)完成HA標(biāo)簽（YPYDVPDYA）融合蛋白的RNA免疫共沉淀（RIP）實(shí)驗(yàn)。ChainFree® Anti-HA磁珠偶聯(lián)的是經(jīng)過(guò)嚴(yán)格篩選、優(yōu)化并重組表達(dá)的無(wú)輕、重鏈的HA抗體，所以IP洗脫液中不會(huì)有抗體輕、重鏈污染。
實(shí)驗(yàn)前先將HA標(biāo)簽與目標(biāo)蛋白在細(xì)胞或組織中融合表達(dá)。裂解樣本后，將ChainFree® Anti-HA磁珠加入樣本中，磁珠上偶聯(lián)的HA抗體與HA標(biāo)簽融合蛋白及其結(jié)合蛋白形成復(fù)合體，去除未結(jié)合的物質(zhì)后，洗脫并分離蛋白與RNA，再利用qPCR（RIP-qPCR）或高通量測(cè)序（RIP-Seq）方法來(lái)鑒定或篩選與目標(biāo)蛋白結(jié)合的RNA。
試劑盒成分
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編號(hào) |
名稱 |
12T規(guī)格 |
24T規(guī)格 |
儲(chǔ)存條件 |
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① |
ChainFree® Anti-HA 磁珠 |
250μL |
500μL |
4℃，1年 |
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② |
裂解緩沖液 |
7mL |
14mL |
4℃，1年 |
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③ |
漂洗液 |
25mL |
50mL |
4℃，1年 |
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④ |
洗脫緩沖液 |
550μL |
1.1mL |
-20℃，1年 |
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⑤ |
蛋白酶抑制劑 |
190μL |
380μL |
-20℃，1年 |
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⑥ |
RNase 抑制劑 |
50μL |
100μL |
-20℃，1年 |
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⑦ |
10mL離心管 |
1個(gè) |
1個(gè) |
—— |
＊注意：該試劑盒包含足夠完成12、24或40個(gè)反應(yīng)的試劑，每個(gè)反應(yīng)使用40μL磁珠。由于每次pull-down實(shí)驗(yàn)至少需要設(shè)置一個(gè)實(shí)驗(yàn)組和一個(gè)陰性對(duì)照組，因此一次實(shí)驗(yàn)至少需要使用2個(gè)反應(yīng)的試劑量。
額外所需材料
1. 自備試劑：HA抗體、PBS、RNase-free 水、Trizol、 氯仿、異丙醇、75%乙醇。
2.所需儀器：磁力架、混勻儀、低溫離心機(jī)、超聲波破碎儀。
使用說(shuō)明
I 注意事項(xiàng)
1. 請(qǐng)勿干燥、冷凍或劇烈渦旋磁珠，禁止長(zhǎng)時(shí)間置于磁場(chǎng)，這些操作可能會(huì)引起磁珠聚團(tuán)，降低結(jié)合活性。
2. 為保證磁珠均勻分布，請(qǐng)?jiān)谑褂们巴ㄟ^(guò)反復(fù)顛倒、輕微渦旋徹底混勻磁珠。
3. 請(qǐng)務(wù)必使用無(wú) RNase 的實(shí)驗(yàn)材料：如離心管、槍頭等。
4. 實(shí)驗(yàn)的具體樣品量和孵育時(shí)間依賴于每個(gè)特定體系，可能需要優(yōu)化才能得到最大產(chǎn)量。
5. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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