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產(chǎn)品簡介

本試劑盒采用ChainFree® Anti-HA磁珠來完成HA標(biāo)簽（YPYDVPDYA）融合蛋白的RNA免疫共沉淀（RIP）實驗。ChainFree® Anti-HA磁珠偶聯(lián)的是經(jīng)過嚴(yán)格篩選、優(yōu)化并重組表達(dá)的無輕、重鏈的HA抗體，所以IP洗脫液中不會有抗體輕、重鏈污染。

實驗前先將HA標(biāo)簽與目標(biāo)蛋白在細(xì)胞或組織中融合表達(dá)。裂解樣本后，將 ChainFree® Anti-HA 磁珠加入樣本中，磁珠上偶聯(lián)的HA抗體與HA標(biāo)簽融合蛋白及其結(jié)合蛋白形成復(fù)合體，去除未結(jié)合的物質(zhì)后，洗脫并分離蛋白與RNA，再利用qPCR（RIP-qPCR）或高通量測序（RIP-Seq）方法來鑒定或篩選與目標(biāo)蛋白結(jié)合的RNA。

試劑盒成分

＊注意：該試劑盒包含足夠完成12、24或40個反應(yīng)的試劑，每個反應(yīng)使用40μL磁珠。由于每次pull-down實驗至少需要設(shè)置一個實驗組和一個陰性對照組，因此一次實驗至少需要使用2個反應(yīng)的試劑量。

額外所需材料

1. 自備試劑：HA抗體（用于Western-Blot檢測）、PBS、RNase-free水、Trizol、 氯仿、異丙醇、75%乙醇。

2.所需儀器：磁力架、混勻儀、低溫離心機(jī)、超聲波破碎儀。

使用說明

I 注意事項

1. 請勿干燥、冷凍或劇烈渦旋磁珠，禁止長時間置于磁場，這些操作可能會引起磁珠聚團(tuán)，降低結(jié)合活性。

2. 為保證磁珠均勻分布，請在使用前通過反復(fù)顛倒、輕微渦旋徹底混勻磁珠。

3. 請務(wù)必使用無 RNase 的實驗材料：如離心管、槍頭等。

4. 實驗的具體樣品量和孵育時間依賴于每個特定體系，可能需要優(yōu)化才能得到最大產(chǎn)量。

5. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

說明書：F1515 HA-Tag RIP 試劑盒（植物）.pdf (199.64 K)